W artykule zastanów się, co to jest - diagnostyka PCR? Wirus brodawczaka ludzkiego (HPV) jest dziś bardzo powszechną chorobą, która występuje w postaci przewlekłej i jest obarczona częstymi nawrotami. Reakcja łańcuchowa polimerazy (PCR) to najnowocześniejsza metoda diagnozowania wirusa brodawczaka. Ta metoda jest uważana za bardzo niezawodną i pomaga zidentyfikować nie tylko obecność tego wirusa w ludzkim ciele, ale także jego ilość i różnorodność. Analiza PCR pod kątem HPV jest wrażliwa nawet na nieaktywne formy wirusa, w których nie ma zewnętrznych objawów w postaci brodawek narządów płciowych i brodawczaków.
Na czym opiera się ta metoda?
Na podstawie badania DNA pacjenta w celu wykrycia obecności obcych składników w tym łańcuchu. Składa się z czterech nukleotydów, które ułożone są w określonej kolejności. Jeśli wirus dostanie się do organizmu, następuje zmiana kolejności w tym łańcuchu, co pozwala uważnie monitorować aktywność nawet najmniej znaczących obcych cząstek. Technikę badawczą HPV PCR przeprowadza się przy użyciu cząstek wirusowych, które określają szybkość podziału komórek.
Co definiuje badania?
Ta zasada diagnostyczna pozwala śledzić aktywność HPV nie tylko w stanie pasywnym, ale także w okresie inkubacji. Diagnostyka PCR określa:
- obecność HPV w organizmie;
- szczepy, które infekują pacjenta;
- zawartość ilościowa w ciele.
Wirus brodawczaka infekował większość ludzi, ale silna obrona immunologiczna tłumi jego objawy i nie pozwala na rozmnażanie. Tak więc wykrycie HPV w sposób jakościowy nie zawsze może być uzasadnione, ponieważ obecność cząsteczek wirusa w organizmie nie jest racjonalna, ale ich wpływ jest tak minimalny, że w żaden sposób nie szkodzi człowiekowi. Analiza jakościowa pokazuje pozytywny wynik, co często dezorientuje osobę.
Metoda ilościowa
Dlatego do diagnozy najczęściej stosuje się metodę ilościową, która pozwala śledzić liczbę czynników wirusowych w organizmie i określić, jak niebezpieczna jest ich aktywność. Ponadto ważne jest ustalenie różnorodności szczepów HPV. Dzieli się je ze względu na stopień onkogenności: niektóre mogą stać się głównym czynnikiem występowania chorób onkologicznych, inne są całkowicie bezpieczne i mogą powodować tylko niektóre problemy kosmetyczne.
Każda indywidualna sytuacja wymaga indywidualnego podejścia,dlatego przed poddaniem się temu testowi laboratoryjnemu wskazane jest skonsultowanie się z wykwalifikowanym specjalistą, który poinformuje Cię, jak i dla jakich szczepów najlepiej przeprowadzić badanie, biorąc pod uwagę stan pacjenta i objawy kliniczne.
Wskazania do przewodzenia
Najważniejszym powodem poddania się testowi PCR na HPV jest obecność brodawek na ciele.
Zakażenie tym wirusem jest możliwe tylko od osoby. Po przeniknięciu do krwiobiegu patogenny mikroorganizm zaczyna się namnażać w górnych warstwach skóry, co prowadzi do rozwoju charakterystycznych objawów - powstawania kłykcin lub brodawczaków. Ponieważ choroba ta jest dość powszechna i występuje u prawie 80% populacji, prawdopodobieństwo jej zachorowania jest niezwykle wysokie. Wirusy brodawczaka są przenoszone przez:
- współżycie bez zabezpieczenia;
- podczas całowania;
- przy porodzie dziecka od mamy;
- w domowy sposób;
- przy bliskim kontakcie ze skórą.
Głównymi wskazaniami do badania krwi i rozmazu PCR w kierunku HPV są objawy skórne tej choroby, które wyglądają jak wiszące brodawki na cienkiej nitkowatej łodydze. Nawet jeśli takie kłykciny nie są obserwowane na skórze, wirus może nadal być obecny we krwi, ale jego przebieg będzie bezobjawowy. W przypadku zdiagnozowania u pacjenta infekcji wirusem brodawczaka 18. i 16. podtypu zaleca się regularne badanie przez specjalistów, takich jak ginekolog i urolog, poddanie się procedurom diagnostycznym i przebadanie w kierunku HPV, ponieważTylko dzięki wczesnej diagnozie możliwe jest zapobieganie rozwojowi niektórych nowotworów.
Rodzaje technik
W ramach diagnostyki PCR dla HPV opracowano cztery główne metody testowania, z których każda ma pewne specyficzne cechy i jest zalecana z uwzględnieniem stanu chorej osoby. Aby wybrać najlepszą metodę, wymagana jest porada eksperta. A więc cztery metody:
- Metoda jakościowa stosowana do obalenia lub potwierdzenia obecności wirusa w organizmie. Jego główną wadą jest niemożność ustalenia rodzaju szczepu HPV (tylko typy 14-21). Najczęściej metodę jakościową stosuje się jednocześnie z innymi metodami wykrywania wirusa brodawczaka. Wynik jest zgłaszany przy użyciu dwóch ocen: „nie znaleziono” lub „wykryto”. Oznacza to, że ta technika albo stwierdza obecność obcego DNA, albo wskazuje na jego brak.
- Genotypowanie to metoda, która może określić obecność wirusa w organizmie człowieka i ustalić jego różnorodność. Metodę tę stosuje się w przypadkach, gdy konieczne jest ustalenie, czy DNA wirusa pozostaje po leczeniu lub obserwuje się nawrót w wyniku nowej infekcji. Genotypowanie pomaga ocenić skuteczność terapii poprzez określenie typu wirusa HPV. Jeśli jest to ten sam szczep, na który pacjent był leczony, to leczenie nie powiodło się. Jeśli analiza wykaże obecność innego typu HPV, może to wskazywać:reinfekcja.
- Metoda łączona, która jest wysoce specjalistyczną metodą diagnostyczną opartą na połączeniu wykrywania jakościowego i wykrywania 16 szczepów za pomocą genotypowania. Wynik może być reprezentowany przez 3 odpowiedzi: „wykryto szczep 16”, „nie wykryto” i „wykryto HPV typu 16 włącznie”. Ta metoda jest stosowana, gdy podejrzewasz obecność wirusa brodawczaka, który może powodować raka szyjki macicy u kobiet.
- Ilościowa metoda PCR dla HPV o wysokim ryzyku onkogennym, która pozwala określić poziom wirusa we krwi i śledzić jego rozwój. Jest uważany za najbardziej pouczający, ponieważ pozwala określić nasilenie procesu patologicznego, na podstawie którego dobierane jest właściwe leczenie. Technika polega na określeniu liczby komórek wirusa w obrębie badanych 100 tys. Jeśli ich suma wynosi powyżej 5, oznacza to wysokie stężenie wirusa brodawczaka w organizmie, co zwiększa prawdopodobieństwo komórek rakowych. Jeśli ilość jest mniejsza niż 3, stężenie jest uważane za nieistotne.
Jak przygotować i przystąpić do testu?
Krew może być pobierana jako biomateriał dla wirusa HPV, ale najczęściej pobiera się wydzieliny z cewki moczowej u mężczyzn i szyjki macicy u kobiet.
Specjalne przygotowanie do PCR na HPV nie jest wymagane. Głównym warunkiem jest nie oddawanie moczu na kilka godzin przed zabiegiem. Ponadto wskazane jest, aby nie odbyć stosunku płciowego na 2-3 dni przed badaniem i nieweź napoje alkoholowe. Jednocześnie nie zapomnij o zabiegach higieny intymnej.
Dla mężczyzn
Mężczyźni pobierają wymaz - główka prącia i cewka moczowa są traktowane solą fizjologiczną. Specjalista używa specjalnej szczoteczki, którą wkłada się do cewki moczowej na około 4 cm, materiał biologiczny jest zbierany z lekkim obrotem, umieszczany w probówce i wysyłany do laboratorium do badań. Jednocześnie możesz go przechowywać nie dłużej niż 2 dni od momentu odbioru.
Kobiety
Rozmaz do analizy PCR pod kątem HPV u kobiet wykonuje się w następujący sposób: sterylny roztwór jest nakładany na szyjkę macicy, a następnie pobiera się wymaz z kanału szyjki macicy za pomocą szczoteczki. Urządzenie wprowadza się na głębokość około 1 cm, po czym lekarz ruchami rotacyjnymi ociera ściany kanału. Materiał biologiczny umieszczany jest w specjalnej probówce, w której pozostaje przez około 15 sekund. W nim specjalista wyciera go o ściany, a następnie wyjmuje. Następnie zawartość probówki przesyłana jest do badań laboratoryjnych.
Właściwe pobieranie próbek materiału do badań jest kluczem do skutecznej diagnozy i uzyskania wiarygodnego wyniku. Jeśli w tym samym czasie zostanie naruszona sterylność, a do probówki wnikną obce mikroorganizmy, podczas analizy może zostać rozpoznany wirus, którego w rzeczywistości nie ma w ciele pacjenta. Błąd może również wystąpić z powodu małej ilości materiału pobranego do badań.
Gdzie wziąć PCR na HPV, wiele osób jest zainteresowanych. Testy można wykonać w każdym medycynieklinika lub laboratorium, na przykład w „Invitro” lub „Hemotest”.
Korzyści z metody
PCR jest jedną z głównych metod diagnostycznych i na chwilę obecną pozostaje najpopularniejszą wśród lekarzy. Badanie to jest przeprowadzane nie tylko w celu wykrycia HPV, ale także pozwala wykryć inne patologiczne mikroorganizmy, które mogą być przenoszone przez kontakt seksualny. Taka analiza pomaga zdiagnozować ukryte infekcje, zapalenie wątroby itp. Test PCR na HPV ma szereg zalet w porównaniu z innymi metodami wykrywania chorób. Te korzyści to:
- Wysoka specyficzność. Analiza pozwala z dużym prawdopodobieństwem oddzielić ślady obcego DNA podczas badania zebranego biomateriału.
- Wysoka wydajność. Badanie PCR to zautomatyzowany proces, który pomaga przeprowadzić badanie bezpośrednio w dniu analizy. Ta prędkość pozwala osobie nie martwić się o wyniki przez długi czas i dostać ją w swoje ręce w ciągu kilku dni.
- Wysoka czułość. Testowanie umożliwia zbadanie aktywności wirusów nawet w okresie inkubacji, kiedy ich stężenia są bardzo niskie. Pomaga to zapobiec wystąpieniu procesu patologicznego i rozpocząć terapię na czas.
- Możliwość wykonania kilku analiz jednocześnie. Na podstawie pojedynczej próbki krwi pobranej można przeprowadzić diagnostykę w celu określenia kilku chorób jednocześnie. Na przykład możesz jednocześniezidentyfikować czynnik sprawczy rzeżączki i chlamydii. Jednocześnie ta procedura nie będzie w stanie negatywnie wpłynąć na wiarygodność wyniku.
Wady badania
Pomimo dużej popularności i informacyjności tej analizy, istnieją pewne negatywne aspekty diagnostyki PCR pod kątem HPV. Najważniejszym z nich jest prawdopodobieństwo wyników fałszywie dodatnich. Dzieje się tak, gdy terapia została już przeprowadzona, infekcja została zniszczona, ale martwe komórki wirusa nadal pozostają w tkankach organizmu. Odnowa komórek zajmuje trochę czasu. Jeśli przeprowadzisz badanie wcześniej niż 2-3 miesiące po leczeniu, PCR może wykazać pozytywny wynik. Technika nie zauważa żadnych różnic, ponieważ ma na celu poszukiwanie wirusowego DNA, które można znaleźć nawet w już martwych komórkach. Przyczynia się to do fałszywie pozytywnych wyników. Sytuacji tej można uniknąć, jeśli badanie laboratoryjne zostanie przeprowadzone w terminie określonym przez lekarza prowadzącego.
Transkrypcja
Co pokaże deszyfrowanie PCR dla HPV?
Lekarz powinien zinterpretować wyniki testu. Ale ważne jest również, aby pacjent był świadomy struktury arkusza wyników. Jeśli analiza wskazuje „Nie wykryto DNA”, oznacza to, że we krwi nie ma wirusa brodawczaka. Jeśli wskaźnik Lg wynosi 5 lub więcej, oznacza to jego wysokie stężenie we krwi, Lg 3-5 - ilość znaczna, poniżej 3 - ilość nieznaczna.
Analiza fałszywie negatywna
Również,może wystąpić analiza fałszywie ujemna. Występuje, jeśli:
- Zgromadzony materiał biologiczny był niewłaściwie przechowywany lub transportowany;
- sterylne warunki zostały naruszone, a inne mikroorganizmy dostały się do krwi pacjenta;
- ze względu na nieodpowiednie odczynniki.
Aby wyeliminować możliwość uzyskania wyników fałszywie ujemnych, konieczne jest wybranie do tej analizy zatwierdzonego laboratorium z wysoko wykwalifikowanym personelem.
Dokładnie zbadaliśmy, jak i dlaczego przeprowadza się diagnostykę PCR. Co to jest jest teraz jasne.
