Co to są badania bakteriologiczne? Według jakiego schematu jest to realizowane? Co w tym przypadku oznacza bezpieczeństwo? Jakie są cele i etapy badań bakteriologicznych?
Informacje ogólne
Badanie bakteriologiczne to proces naukowy, w którym identyfikowane są bakterie i badane są ich właściwości w celu postawienia diagnozy mikrobiologicznej. Duże znaczenie ma tutaj określenie typu lub gatunku powstałego mikroorganizmu (implikuje się czystą kulturę). Towarzyszy temu badanie właściwości biochemicznych i fizjologicznych organizmów, a także tendencji do tworzenia toksyn. W tym celu stosuje się reakcje strącania i aglutynacji. Praktykuje się również zarażanie zwierząt laboratoryjnych z późniejszym wykryciem zmian patologicznych.
Praca z materiałem testowym
Algorytm badań bakteriologicznych zapewnia ścisłe przestrzeganie specjalnych instrukcji. W związku z tym materiał do badań należy zebrać na sterylnych szalkach w warunkach aseptycznych. Niezbędna jest również dbałośćzapewnić jak najszybszą dostawę do laboratorium. Pożądane jest przechowywanie próbek w chłodni. Technika badań bakteriologicznych przewiduje wiele możliwych sytuacji. Tak więc rodzaj przedmiotu, właściwości drobnoustroju i charakter choroby często powodują konieczność opracowania indywidualnych instrukcji pracy. W pracy wykorzystuje się wiele różnych metod. Jedną z najczęstszych jest bakterioskopia. Ale jeśli bakterie nie są utrwalone, stosuje się zmiażdżoną lub wiszącą kroplę. Należy zauważyć, że dwie ostatnie opcje charakteryzują się podwyższonym poziomem zaraźliwości.
Bakterioskopia
W tym przypadku używane są pociągnięcia. Aby je stworzyć, musisz rozprowadzić kroplę badanego płynu na powierzchni szklanego szkiełka. Zates powinien to wysuszyć. Często odbywa się to poprzez przenoszenie leku przez płomień uzyskany z palnika gazowego. Chociaż jako alternatywę można stosować związki utrwalające. Aby wskazać, że z tym preparatem przeprowadzono działania przygotowawcze, jest on zabarwiony. Celem takiej manipulacji jest dokładność, która jest bardzo ważna przy wykonywaniu badań mikroskopowych i bakteriologicznych. W końcu, jeśli ponownie użyjesz leku w innym celu, otrzymasz owsiankę, z którą bardzo trudno będzie efektywnie pracować.
Dlaczego bakterioskopia jest tak popularna
Nie tylko ze względu na dostępność tej metody. Jeśli przeprowadzane jest badanie bakteriologiczne świeżego preparatu, to w celu określenia patogenuMożna zastosować reakcje mikrochemiczne lub selektywne barwienie różnych części strukturalnych drobnoustroju. Który jest lepszy? Dokładniejszy wynik można uzyskać podczas pracy z kolorowym preparatem. W tym przypadku materiał testowy nakłada się na wstępnie przygotowany szkiełko. I pamiętaj, aby cienką (a jeśli to możliwe równą) warstwę. Następnie musisz poczekać, aż lek wyschnie w powietrzu. Mikroorganizmy są następnie utrwalane przy użyciu jednej z konwencjonalnych metod. Następnie schłodzony preparat poddaje się barwieniu farbą różnicową lub zwykłą. W tym celu można stosować preparaty suche i natywne. Następnie pozostaje skierować promienie ultrafioletowe lub krótkie niebieskie do miejsca gromadzenia się organizmów, co powoduje świecenie całego drobnoustroju lub niektórych części jego ciała.
Praktyczne zastosowanie bakterioskopii
Służy do diagnozowania wielu chorób zakaźnych. Najbardziej znane z nich to gruźlica, rzeżączka i gorączka nawracająca. Ponadto uciekają się do badań w celu zbadania całego kompleksu mikroflory narządu lub produktu. Ale krytycy często wskazują na względną niewiarygodność i niedokładność tej metody.
Uprawy i subkultury kultur bakteryjnych
Przeprowadź je za pomocą pipety Pasteura. Przeprowadzenie badania bakteriologicznego i cytologicznego jest często trudne do wykonania bez inokulacji i podhodowli w trakcie przepływu pracy. Podczas pracy z pipetą Pasteura jej końcówkazerwać pęsetą. Samo narzędzie jest następnie przenoszone przez płomień palnika, a następnie pozostawiane do ostygnięcia. Nawiasem mówiąc, do siewu można stosować zarówno pożywki płynne, jak i stałe. Na wybór ma wpływ, jakie cele badań bakteriologicznych są realizowane. Jednocześnie konieczne jest przestrzeganie algorytmu pracy i środków ostrożności. Tak więc podczas pracy z płynną pożywką należy upewnić się, że nie wylewa się i nie zwilża krawędzi korka i probówek. Kiedy badanie przeprowadza się na materiale stałym, często do wchodzenia do hodowli używa się specjalnej igły. Podczas siewu i ponownego wysiewu należy je wykonywać w pobliżu płomienia palnika gazowego. Dla czystości eksperymentu probówka nie powinna pozostawać otwarta przez długi czas. Co do narzędzia z kulturą: należy się upewnić, że niczego nie dotyka. Również technika badań bakteriologicznych przewiduje wypalanie brzegów probówki przed jej zamknięciem. Gotowy produkt powinien być podpisany natychmiast po wyprodukowaniu, aby uniknąć pomyłek w przyszłości.
Wydajność siewu
Uważa się, że ta metoda pozwala na uzyskanie dokładniejszych i bardziej wiarygodnych danych podczas diagnostyki bakteriologicznej niż wcześniej rozważana bakterioskopia. W tym przypadku algorytm działań wygląda następująco:
- Na początku czystą kulturę rozsmarowuje się na powierzchni pożywki, która jest przelewana na szalkę Petriego.
- Wstępny siew należy wykonywać w warunkach korzystnych dla gatunkumikroorganizmy.
- Po dniu lub dwóch, w obecności optymalnego środowiska, wszystkie odpowiednie kolonie przemieszczają się tam, gdzie mogą się maksymalnie rozwinąć. To uwalnia je w ten sposób od obcej mikroflory.
Ostatecznym rezultatem jest hodowla jednorodnych bakterii, które można zidentyfikować.
Czyste kultury
Ale jak są zrobione? W tym celu stosuje się metody biologiczne i mechaniczne. W pierwszym przypadku dużą rolę odgrywają pożywki, w których istnieją niezbędne warunki sprzyjające rozwojowi danej kultury. Podejście można również zastosować, gdy zwierzęta laboratoryjne podatne na określony rodzaj bakterii zostaną zakażone. Metody mechaniczne opierają się na użyciu sterylnego narzędzia, za pomocą którego hodowlę umieszcza się w pożywce znajdującej się na pierwszej, drugiej i trzeciej szalce Petriego. Następnie trzeba poczekać, aż wyrosną poszczególne kolonie, a czysta kultura już się od nich wyróżni. Bakterie można również hodować w specjalnych termostatach, w których temperatura jest utrzymywana na określonym poziomie (zwykle około 37 stopni). W takim przypadku proces trwa około jednego dnia. Jednak w zależności od rodzaju drobnoustrojów można ustalić inne terminy. Ważna jest również obecność wymaganego stężenia tlenu. Aby to zrobić, użyj różnych metod napowietrzania. Do tej pory rozmawialiśmy o sytuacji jako całości i ogólnie, ale teraz skupmy naszą uwagę na tym, jaki jest schemat badań bakteriologicznych.
Praktyka
Zestaw metod jest często używany do wykrywania patogennych mikroorganizmów w ciele pacjenta lub potencjalnego nosiciela. Zastosowane materiały i metody zależą od celów analizy, a także od warunków środowiska, w którym prowadzona jest praca. W praktyce bakterie najczęściej wykrywa się poprzez posiew krwi pobranej od osoby lub zwierzęcia. Jeśli zmiany miejscowe są dobrze zdefiniowane, patogeny można szukać w obszarach problemowych. Jest to typowe dla takich dolegliwości jak czerwonka, rzeżączka, błonica i wielu tym podobnych. W szczególnie ciężkich przypadkach proces ten dzieli się na odrębne etapy badania bakteriologicznego (co jest typowe dla duru brzusznego). Każdy z nich stosuje własne metody, które mają na celu znalezienie przyczyny infekcji. Przyjrzyjmy się bliżej sytuacji z tyfusem. W pierwszym tygodniu choroby najbardziej niezawodnym sposobem diagnozowania choroby są posiewy krwi. Z drugiej strony za takie uważa się badanie serologiczne. W trzecim tygodniu badane są stolce. Ostatnią metodą jest sprawdzanie rekonwalescentów.
Identyfikacja mikroorganizmów
Rozpoczyna się proces barwienia. Następnie przyglądają się, jak bakteria może rozkładać węglowodany, aminokwasy i tak dalej. Dodatkowo proces ten można uzupełnić badaniem innych właściwości, które posiada każdy poszczególny rodzaj lub gatunek drobnoustrojów. Jako przykład należy podać możliwości rozpuszczania erytrocytów różnych zwierząt, wpływ na krzepnięcie osocza krwi i rozpuszczanie skrzepów.fibryna i tak dalej. Wszystko to są cechy różnicujące poszczególnych przedstawicieli mikroświata. Również identyfikacja serologiczna może być wykorzystana do ostatecznego rozpoznania (ale zwykle dotyczy to bakterii chorobotwórczych należących do rodziny jelitowej).
Wniosek
Należy zauważyć, że wielu drobnoustrojów nie można zidentyfikować metodami opisanymi w artykule. W tym przypadku szeroko stosowana jest praktyka zarażania zwierząt laboratoryjnych. Obliczenia opierają się na fakcie pojawienia się charakterystycznej toksygenności lub patogenności, której nie obserwuje się w sztucznych warunkach. Infekcję można również wykorzystać jako metodę akumulacji drobnoustrojów chorobotwórczych. A już po porównaniu cech badanej kultury, znalezionych w procesie badania właściwości biologicznych, morfologicznych, serologicznych i biochemicznych, możemy powiedzieć, że wiadomo, z jakimi drobnoustrojami mamy do czynienia. Identyfikacja oznacza wskazanie rodzaju, gatunku i typu bakterii. Jeżeli badany mikroorganizm różni się pewnymi właściwościami od swojej typowej cechy, należy to wskazać. Wielu ekspertów uważa, że w takich przypadkach przydatna będzie ponowna identyfikacja z powieleniem wszystkich stosowanych metod i technik. Czasami badania można przenieść na wyższy poziom, co wymaga poważniejszego (i bardziej kosztownego) podejścia. Jeśli uzyskano wyniki negatywne, oznacza to, że preparatmikroorganizmy były nieobecne lub były niezdolne do życia. Ale dla dokładności badań, jeśli podejrzewa się pewną liczbę nosicieli Bacillus (czerwonka, błonica, dur brzuszny), w takich przypadkach przedstawiane są powtórne kontrole. Jest to konieczne, aby specjaliści mieli dokładne pojęcie o tym, z czym mają do czynienia.
