Aglutynacja krwi to aglutynacja i sedymentacja czerwonych krwinek, bakterii i innych komórek przenoszących antygeny.
Proces zachodzi pod wpływem aglutynin, które są specyficznymi substancjami. Jako substancje te działają lektyny lub przeciwciała.
Możliwe rodzaje aglutynacji podczas określania grupy krwi
Aglutynacja jest specyficzna i niespecyficzna. W pierwszym przypadku reakcja zachodzi przy udziale trzech składowych:
- antygeny;
- przeciwciała;
- elektrolity (użyj roztworu izotonicznego).
Podczas określania grupy krwi wykorzystywane są wszystkie możliwe rodzaje aglutynacji, ale nie jest to jedyny przypadek.
W jakim celu jest używany?
Test aglutynacji krwi służy do identyfikacji czynnika wywołującego chorobę zakaźną. Jednocześnie osadza się i łatwo go wykryć w osadzie. Proces ten jest wykorzystywany, jak wspomniano powyżej, do określania grupy krwi. To omówimy dalej.
Jakie są funkcje?
Erytrocyty zawierają antygeny typu A i Bwiążą się odpowiednio z przeciwciałami ά i β. Grupy krwi i reakcje aglutynacji:
- 1, 0 (ά, β) - brak antygenów na powierzchni erytrocytów;
- 2, A (β) – obecne antygen A i przeciwciało β;
- 3, B (ά) - zawiera antygen B i przeciwciało ά;
- 4, AB (00) – obecne dwa antygeny, brak przeciwciał.
Warto zauważyć, że antygeny są już obserwowane w zarodku. Jeśli chodzi o przeciwciała, pojawiają się po urodzeniu, w pierwszym miesiącu życia.
Zgodność ludzi zależy od grupy krwi. To jest powód odrzucenia płodu przez ciało matki. Innymi słowy, ma przeciwciała przeciwko antygenom krwi nienarodzonego dziecka. W takim przypadku występuje niezgodność. Ponadto podczas transfuzji należy wziąć pod uwagę grupę krwi.
Przygotowanie
Grupy krwi i reakcje aglutynacji to zgodne pojęcia, które są często używane w medycynie.
Przed testem ważne jest, aby postępować zgodnie z określonymi instrukcjami. Konieczne jest czasowe wykluczenie stosowania niektórych produktów spożywczych i leków. Pomoże to zwiększyć dokładność wyników. Zalecenia, których należy przestrzegać, są przepisywane przez lekarza. Faktem jest, że różne laboratoria mogą nie mieć tych samych zakresów uzyskiwanych wartości, czyli są nieco różne.
Warunki testowe
Aby dokładnie określić grupę krwi, ważne jest, aby wybrać odpowiedni sprzęt. Należą do nich:
- sól fizjologiczna i pipeta;
- szklane pręty;
- standardowe surowice izohemaglutynujące;
- suche płyty ceramiczne podzielone na 4 sektory.
Istnieją wymagania dotyczące warunków testu:
- światło dzienne;
- temperatura pomieszczenia powyżej +16 ˚С;
- używając objętości krwi i surowicy w stosunku 1:10;
- Wiarygodne wyniki w ciągu 5 minut.
Powyżej przedstawiono główne warunki i narzędzia. Aglutynację krwi można przeprowadzić na kilka sposobów, a każdy z nich stawia indywidualne wymagania.
Metody
Możliwe metody oznaczania grupy krwi za pomocą aglutynacji:
- metoda standardowa;
- reakcja krzyżowa;
- użycie tsoliklonów;
- metoda ekspresowa przy użyciu zestawu „Erythrotest-Groupcard”.
Metoda standardowa
Aglutynacja krwi objawia się za pomocą czerwonych krwinek pacjenta. Stosowane są również standardowe surowice, które zawierają znane antygeny.
Jedna kropla czterech serum jest umieszczana na płaskiej płytce. Następnie za pomocą szklanych pręcików wprowadza się na nią badaną krew pacjenta. W takim przypadku wygodnie jest używać zakraplaczy. Stosunek powinien wynosić 1:10. Serum i krew są delikatnie wymieszane. Oceny można dokonać w ciągu pięciu minut.
Odszyfrowanie wyników testu za pomocą prostej metody
Po określonym czasiew kroplach surowicy obserwuje się oświecenie. W niektórych widać, że wystąpiła aglutynacja erytrocytów (małe płatki), w innych jej nie ma.
Istnieją następujące opcje:
- brak reakcji we wszystkich próbkach surowicy − 1 grupa;
- krzepnięcie występowało wszędzie z wyjątkiem drugiej próbki - grupa 2;
- brak reakcji tylko w 3 próbce - 3 grupie;
- aglutynacja występowała wszędzie – grupa 4.
Dlatego najważniejsze jest prawidłowe rozprowadzenie serum. Wtedy nie będzie trudno rozszyfrować wynik. Jeśli aglutynacja krwi jest słaba, zaleca się ponowne badanie. W przypadku małych płatków są one badane pod mikroskopem.
Reakcja krzyżowa
Czasami niemożliwe jest dokładne określenie grupy krwi w prosty sposób. Aglutynację w tym przypadku przeprowadza się metodą reakcji krzyżowej. W przeciwieństwie do pierwszej wersji testu, ważne są tutaj standardowe erytrocyty. Krew pacjenta pobierana jest do probówki, odwirowywana, a następnie za pomocą pipety wypompowywana jest surowica do dalszych badań.
Układa się go na talerzu w ilości 2 kropli, następnie dodaje się do niego standardowe krwinki czerwone grupy A i B. Zawartość miesza się poprzez potrząsanie pojemnikiem.
Wyniki metody reakcji krzyżowej
Po pięciu minutach próbki są gotowe do przeglądu. Dostępne opcje to:
- sklejenie wystąpiło w obu kroplach – 1 grupa;
- płatki nie sąnie zaobserwowano w żadnej z próbek – grupa 4;
- proces jest widoczny w jednej próbce - 2 lub 3 grupy (w zależności od tego, gdzie dokładnie skrzepła krew).
Metoda Coliclon
Aby określić grupę krwi, w ten sposób przeprowadza się aglutynację przy użyciu syntetycznych substytutów surowicy. Nazywane są tsoliklonami. Zawierają sztuczne substytuty ά i β-aglutyn znane jako erytrotesty (odpowiednio różowy i niebieski). Reakcja zachodzi między nimi a czerwonymi krwinkami pacjenta.
Ta metoda jest najbardziej dokładna i niezawodna. Zasadniczo nie wymaga ponownego sprawdzenia. Ocena wyników odbywa się analogicznie jak w przypadku metody standardowej. Osobliwością jest to, że czwarta grupa krwi musi być koniecznie potwierdzona reakcją z określonym syntetycznym substytutem (anty-AB). Ponadto nie skleja się po dodaniu roztworu chlorku sodu.
Metoda ekspresowa z zestawem „kart grupy erytrotestów”
Biorąc pod uwagę możliwe metody analizy przy określaniu grupy krwi, warto zauważyć, że metoda ta ma swoją własną charakterystykę. Polegają na tym, że wynik można ocenić nie tylko w laboratorium, ale także w terenie. Do badania używany jest specjalny zestaw. Zawiera kartę dołkową z wysuszonymi odczynnikami już obecnymi na dnie. Oprócz anty-AB, anty-A i anty-B, anty-D jest używany do określenia czynnika Rh.
Ta metoda nie wymaga specjalnego przygotowania, dopuszcza się użycie krwi pobranej z palca, dozwolona jest obecność w niej konserwantów. Najpierw musisz dodać kroplę wody do każdego dołka, aby rozpuścić składniki. Następnie dodaje się krew, lekko miesza. Za trzy minuty otrzymasz wynik.
Fałszywa aglutynacja
Czasami dane uzyskane po teście nie są prawdziwe. Zjawisko to zależy od pewnych czynników.
Istnieją trzy rodzaje fałszywych reakcji:
- Pseudoaglutynacja. Prawdziwe wiązanie nie występuje, erytrocyty po prostu fałdują się w postaci kolumn monet. Jeśli dodasz kilka kropli soli fizjologicznej, rozpadną się. Podobne zjawisko rozpoznaje się pod mikroskopem.
- Aglutynacja krwi na zimno. Taką reakcję obserwuje się, gdy warunki do badania były niekorzystne. Gdy temperatura jest poniżej +16˚C, może wystąpić sklejanie.
- Panaaglutynacja. Jeśli we krwi występuje infekcja, wyniki testu mogą być fałszywe. Zjawisko to jest również możliwe w przypadku chorób onkologicznych, z sepsą.
Aglutynacja jest bardzo ważna w medycynie. Pozwala nie tylko określić grupę krwi, ale także zidentyfikować czynnik sprawczy chorób, a także obecność infekcji. Najważniejsze jest przestrzeganie zaleceń lekarza podczas przygotowania do tej procedury. W odniesieniu do personelu medycznego ich zadaniem jest tworzenie sprzyjających warunków izgodność ze wszystkimi zasadami. To jedyny sposób na uzyskanie dokładnych wyników podczas wykonywania aglutynacji krwi.
